微生物培養基配制與滅菌實操：避免污染的關鍵技巧
- 時間：2026-01-16
- 人氣：5
無菌操作與儲存管理：阻斷后續污染途徑
即使完成配制和滅菌，后續的分裝、倒平板及儲存環節仍可能引入污染，需嚴格遵循無菌操作規范。
1. 倒平板的無菌操作要點
倒平板是固體培養基使用前的關鍵步驟，操作不當極易導致污染，具體流程如下：
預熱與消毒：將滅菌后的固體培養基置于 50℃水浴鍋中保溫，防止提前凝固；超凈工作臺紫外消毒 30min 后通風，實驗人員穿戴無菌服、口罩、手套，雙手用 75% 酒精消毒。
火焰滅菌操作：在酒精燈火焰旁開啟錐形瓶棉塞，瓶口快速通過火焰滅菌，防止瓶口雜菌落入。
倒平板規范：每皿倒入 15–20mL 培養基，輕輕晃動培養皿使培養基均勻分布，避免產生氣泡；若出現氣泡，可用無菌接種環輕輕挑破。
凝固與保存：待培養基完全凝固后，將培養皿倒置存放（防止冷凝水滴落污染培養基表面），標記培養基名稱、配制日期，置于 4℃冰箱保存，保存時間不超過 7 天。
2. 培養基儲存的注意事項
儲存條件：固體培養基平板倒置存放于 4℃冰箱，避免陽光直射；液體培養基密封后冷藏，防止揮發和污染。
有效期管理：普通培養基冷藏保存不超過 1 周；含抗生素、血清等特殊成分的培養基需現配現用，最長不超過 3 天。
污染判定：儲存過程中若培養基出現渾濁、異味、菌落或顏色變化，立即丟棄，嚴禁使用。
